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myPOLS 8100S說明書

 發布時間:2018/8/16 點擊量:516

myPOLS Biotec正在開發新一代的DNA聚合酶

用于和可靠的應用,例如個性化醫療,病原體檢測,DNA和RNA診斷,法醫學等等。

 

我們的研發活動包括:

  • 改進的DNA聚合酶用于SNP檢測和甲基化特異性PCR。
  • 病原體檢測分析,例如用于流感和諾如病毒診斷。
  • 具有逆轉錄酶活性的熱穩定DNA聚合酶。
  • 抑制劑抗性聚合酶,用于從樣品中直接PCR,如全血,唾液,細菌,細胞 - 顆粒,植物等。 

 

 

后但并非不重要:我們所有的酶和混合物都是在康斯坦茨內部生產的,并經過常規測試,符合高質量標準。

 

myPOLS Biotec是一家來自康斯坦茨大學的生物技術公司,來自Andreas Marx教授的研究小組。憑借我們在高通量DNA聚合酶設計方面的專業知識,我們為您的應用定制酶。

RRNA / RT-PCR

Volcano2G DNA聚合酶

 

是原始Volcano DNA聚合酶的下一代,具有進一步改善的逆轉錄活性。該酶是一種工程化的,極其熱穩定的逆轉錄酶和組合的DNA聚合酶,通過定向的人工進化獲得。
Volcano2G DNA聚合酶直接從RNA模板促進“零步驟”RT-PCR(沒有等溫逆轉錄步驟),因為在循環PCR延伸步驟期間逆轉錄與DNA擴增同時發生。這也允許在高溫下進行逆轉錄反應,從而小化在高溫下熔化的RNA中的強二級結構遇到的問題。

 

文章

產品

尺寸

#8100S

Volcano2G DNA聚合酶

 250 U,5U /μl,50μl

#8100M

Volcano2G DNA聚合酶

1000U,5U /μl,200μl

 

更簡單,更快捷:0步RT-PCR協議:

 

跳過逆轉錄步驟。不需要等溫反轉錄步驟。 

Volcano2G是一種PCR活性逆轉錄酶,具有*的熱穩定性,在95°C的半衰期> 40 min。

當添加實時PCR染料時,Volcano2G DNA聚合酶也可用于實時PCR。Volcano2G具有Taq DNA聚合酶樣核酸酶結構域,因此也適用于基于水解探針的分析。如此處所示,通過使用基于探針的qPCR測定和零步驟RT-PCR方案,使用10倍稀釋系列的總RNA檢測NONO mRNA:

 

 

詳細的產品說明

Volcano2G 5x反應緩沖液針對擴增子大小在60-300bp之間進行了優化。

當添加合適的實時PCR染料或熒光探針時,Volcano2G逆轉錄酶也可用于實時PCR。
這種*的酶能夠進行基于PCR的RNA檢測,無需單獨的逆轉錄步驟。
Volcano2G逆轉錄酶可以可靠地檢測≥1ng總RNA輸入的RNA靶標。

Volcano2G DNA聚合酶不需要Mn 2+  以獲得宜活性。然而,通過向反應中添加Mn 2+可以進一步優化一些測定(建議的范圍是0.5-1mM,未提供Mn 2+)。

 

質量控制

RT-PCR活性:測試Volcano2G DNA聚合酶活性的成功RT-PCR性能。在PCR循環儀中從人總RNA提取物擴增151bp片段(HPRT1 mRNA),并將其顯示為單一擴增產物。
DNA聚合酶活性:已經使用人工DNA模板和DNA引物監測Volcano2G聚合酶活性并將其調整為特定的DNA聚合酶活性。
通過蛋白質特異性染色確定酶濃度。有關批次特定濃度,請通過info@mypols.de查詢更多信息。

 

存儲

本產品采用冷藏包裝。請在抵達-20°C時存放產品。

應用

  • 快速檢測和鑒定RNA靶標
  • 逆轉錄PCR(RT-PCR)
  • 實時RT-PCR
  • SELEX
  • 入門擴展

 

反應設置

零件

終濃度

引物前移(10μM)

1μl

500 nM(50-1000 nM)

引物反向(10μM)

1μl

500 nM(50-1000 nM)

dNTPs(10 mM)

2μl

400μM

5 x Volcano緩沖區

10μl

1X

Volcano2G DNA聚合酶5 U /μl

1μl

5-10 U /反應

模板/樣品提取物*

各種μl

 >(1-1000)

不含核酸酶的水

總反應體積高達50μl

 

將所有組件保存在冰上。
在使用前仔細旋轉并混合所有溶液。

*推薦的終模板濃度在5-50 ng /μl之間。 

典型的0步RT-PCR方案(不需要等溫逆轉錄步驟)

溫度

時間

初始變性

95℃

2分鐘

變性

95℃

15秒

退火/延伸*

各種*

45秒(25-40周期)

可選的熔化步驟

 

 

可以使用兩步法和三步法PCR方案。
*通過運行溫度梯度來理想地建立新的PCR,以便找到每個引物對的宜退火/延伸溫度。引物的退火溫度受其核酸序列和反應緩沖液組成(鹽和pH)的強烈影響。Volcano2G DNA聚合酶在50-95°C之間活躍。

 

 

 

 

上海起發實驗試劑有限公司是實驗試劑一站式采購服務商

1:強大的進口輻射能力,血清、抗體、耗材、大部分限制進口品等。

2:產品種類齊全,經營超過700多品牌,基本涵蓋所有生物實驗試劑耗材。

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